可見分光光度計的光源由一只6V或者12V、10W 或30W的溴鎢燈，承擔有紫外光部分的還要增加一只氘燈。這些光源在使用一段時間后會老化，表現為亮度下降，這時就要更換一只電壓、瓦數及形狀相同的燈泡，平日也不應將可見分光光度計的透光率（T）調至****。由于每種燈泡的幾何尺寸不可能完全一致，更換時有必要調整燈的位置。氘燈的更換和溴鎢燈不太一樣，需要把卡紙放在入射光處調節燈的位置使圓型光斑圓亮且要處于中心位置。每次更換燈泡后還要做波長的校正，可見光部分用鐠釹玻璃濾光片529 nm, 吸收峰來校正在5-10 nm內，吸收示值大點是529 nm 實際波長，實際波長刻度也要在儀器允許誤差范圍內。校正波長后，還要測試新光源的穩定性。
方法是用一濾光片插人比色杯架中間，機器預熱30 min，然后間隔時間連續讀數并觀察讀數的變化是否符合可見分光光度計的出廠標準。如讀數重復性較差需重新更換燈泡并重復以上工作。紫外光部分方法基本與可見光相同，不同點是利用氘燈的特征譜線486.0 nm和656.1 nm 進行校正。先將波長調至待測波長附近，再將透光率t調至50%后緩緩增加或減少波長，同時觀察透光率的變化，在待測波長附近透光率高一點便是正確的波長位置。要特別注意在更換燈泡時一定要帶上棉手套，以免讓指印污染燈泡表面影響了燈泡亮度。
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